Каталог товаров

F-полимераза

Поставщик: Алкор Био, БХ, ГК Ключевые слова: полимераза, ПЦР, ферменты для ПЦР

F-полимераза — фермент, позволяющий с высокой точностью и скоростью амплифицировать фрагменты ДНК более 10000 bp.

Для исследовательских работ in vitro.

Описание:
F-полимераза является термостабильной высокопроцессивной и высокоточной ДНК полимеразой.
F-полимераза обеспечивает высокий выход продуктов амплификации с разнообразных ДНК-матриц, позволяет амплифицировать фрагменты более 10000 bp, подходит для введения мутаций, безлигазного клонирования генов и библиотек генов.
Области применения:
  • Высокоточная ПЦР;
  • ПЦР длинных фрагментов (>10 kbp);
  • «Direct-ПЦР» с использованием в качестве матрицы ЭДТА-стабилизированной крови (до 15%)
Характеристики фермента:
  • проявляет 5′→3′ полимеразную активность;
  • обладает корректирующей 3′→5′ экзонуклеазной активностью, обеспечивающей высокую точность амплификации (в 50 раз точнее Taq полимеразы)
  • 5′→3′ экзонуклеазная активность отсутствует
  • скорость работы фермента в 10 раз превышает скорость работы Pfu полимеразы, соответственно, время элонгации может быть снижено до 15–30 сек (в зависимости от сложности матрицы) на 1 kbp
  • дает высокий выход продуктов амплификации
  • устойчив к присутствию ингибиторов: до 15% цельной крови можно добавлять напрямую в ПЦР
  • позволяет получать фрагменты ДНК с «тупыми» концами, т.е. не подходит для А/Т клонирования
  • не имеет горячего старта
Описание ПЦР-буферов:
5x буфер HF и 5x буфер GC для F-полимеразы содержат 10 мМ MgCl2, что обеспечивает оптимальную финальную концентрацию MgCl2–2 мМ — в реакционной смеси. В большинстве случаев для проведения высокоточной ПЦР рекомендуется использовать буфер HF для F-полимеразы.
Буфер GC для F-полимеразы применяют при проведении ПЦР на длинных матрицах со сложной вторичной структурой и высоким содержанием GC-пар.
Единица активности:
За одну единицу активности принимается количество фермента, необходимое для перевода 10 нмоль dNTP в кислотно-нерастворимую фракцию за 30 минут при +74°С.
Буфер для хранения/разведения F-полимеразы:
  • 20 мM Трис (pH 8,0);
  • 100 мM хлорид калия;
  • 0,1 мM ЭДТА;
  • 1 мM ДТТ;
  • 50% глицерин;
  • 1% Твин 20