Каталог товаров

ДНК-полимеразы и Урацил-ДНК-гликозилаза

Поставщик: Алкор Био, БХ, ГК Ключевые слова: ферменты для ПЦР, полимераза

ГК Алкор Био предлагает ДНК-полимеразы и Урацил-ДНК-гликозилазу для широкого круга рутинных аналитических исследований.

ДНК-полимеразы

Taq полимераза — высокоочищенный рекомбинантный фермент Taq ДНК полимераза. Идеально подходит для широкого круга рутинных аналитических исследований — амплификация ДНК, проведение ПЦР-скринингов, включение меченых нуклеотидов, ник-трансляция и тд.

Taq М полимераза — высокоочищенный рекомбинантный фермент Taq ДНК полимераза с химической модификацией в активном центре, для обеспечения высокоэффективного горячего старта.

Taq М полимераза обеспечивает высокий выход продуктов амплификации с разнообразных ДНК-матриц при минимальной неспецифической амплификации. Длина фрагмента, который возможно амплифицировать с помощью HS Taq ДНК полимеразы, зависит от природы и качества ДНК-матрицы. В оптимальных условиях она может достигать 5 000 п.о.

Область применения Taq М полимеразы:

  • Амплификация ДНК в рутинных аналитических исследованиях
  • Высокоспецифичная ПЦР
  • Высокочувствительная ПЦР
  • Мультиплексная ПЦР
  • ПЦР в режиме реального времени
Технические характеристики
Характеристики Taq полимераза Taq М полимераза
Горячий старт нет 15 мин, 95°С
Экзонуклеазная активность 5’->3’ 5’->3’
Специфичность амплификации + +++
ПЦР в реальном времени с TaqMan пробами + +++
ПЦР в реальном времени с интеркалирующими красителями + +++
Комплект поставки Буфер для хранения/разведения и MgCl2

Урацил-ДНК-гликозилаза

Риск ложноположительных результатов ПЦР является одной из проблем лабораторий, использующих этот метод в исследовательских и диагностических целях. Причиной этих результатов может стать контаминация реакционной ПЦР-смеси продуктами ранее выполненной ПЦР. Одим из способов предотвращения этого является использование ураци-ДНК-гликозилазы.

Урацил-ДНК-гликозилаза (УДГ) — фермент, катализирующий высвобождение урацила из урацил-содержащих одно- или двуцепочечной ДНК. Образующийся при этом абазический сайт блокирует работу ДНК-полимераз и чрезвычайно подвержен гидролитическому расщеплению при повышенной температуре и высоких значениях pH. Сам фермент также чувствителен к нагреванию и может быть инактивирован при температурах выше 70°С.

Алгоритм использования УДГ:

  1. Замена в реакционных ПЦР-смесях dTTPна dUTP, которая приводит к тому, что все получающиеся ампликоны содержат вместо урациловых оснований тиминовые.
  2. Введение в реакционную смесь УДГ и добавлением к протоколу этапа предобработки, например, 5 мин. при 50°С, в результате чего все контаминанты, которые содержали урациловые основания, перестают быть матрицами для ДНК-полимераз.
  3. Температурная инактивация фермента, в результате которой происходит также гидролитическое расщепление контаминантов, например, 3 мин при 95°С.

УДГ рекомендуется использовать совместно с системами ПЦР в режиме реального времени, этот фермент хорошо совместим с подавляющим большинством ПЦР-буферов.